成年树鼩睾丸维生素D代谢酶CYP24A1表达与生育力相关研究

目的 研究成年树鼩睾丸中维生素D代谢酶和维生素D受体的转录水平,检测CYP24A1的蛋白表达,探索雄性实验树鼩生殖障碍的原因.方法 选择2～3岁雄性树鼩,根据个体繁殖档案分为具有成功生育史的正常组,和无生育史的生殖障碍组,每组各5只.手术摘取一侧睾丸,通过病理学观察其组织病理变化;采用实时荧光定量PCR检测睾丸组织中维生素D受体、维生素D代谢酶mRNA水平的变化,以蛋白印迹法检测CYP24A1的蛋白表达,同时用免疫荧光观察精子CYP24A1表达情况.结果 正常组与生殖障碍组相比曲细精管排列更紧密,生精细胞更多.与正常组相比,生殖障碍组树鼩睾丸组织VDR、CYP2R1、CYP27A1 mRNA水平无明显差异(P>0.05),而CYP24A1在mRNA表达水平和蛋白水平都明显低于正常组(P<0.05).同时免疫荧光结果显示正常组睾丸来源的精子在其头部、颈部和中段的CYP24A1蛋白高表达,而生殖障碍组表现为低表达或不表达.结论 CYP24A1与雄性树鼩成功生育有直接联系,提示CYP24A1可以作为判断雄性树鼩生育力的重要指标.