补骨脂富含的异戊烯基成分对CYP1A1活性的影响及分子对接验证

目的 考察补骨脂富含的异戊烯基成分对CYP1A1活性的影响,并采用分子对接技术进行验证.方法 以7-乙氧基试卤灵为CYP1A1的探针底物,采用超高效液相串联三重四级杆质谱(UHPLC-TQD-MS)对代谢产物试卤灵的质谱条件进行优化;应用CYP1A1体外孵育体系,评价补骨脂富含的补骨脂二氢黄酮、补骨脂定、异补骨脂查尔酮、异补骨脂二氢黄酮和补骨脂二氢黄酮甲醚在不同浓度(1、10、100 μmol·L-1)对CYP1A1活性的影响;采用不同的抑制动力学模型计算相关的抑制常数(Ki);应用Autodock 4.2软件,将活性成分与CYP1A1进行分子对接.结果 初筛结果显示,补骨脂二氢黄酮、补骨脂定、异补骨脂查尔酮、异补骨脂二氢黄酮、补骨脂二氢黄酮甲醚对CYP1A1均表现出抑制活性,IC50 值分别为0.28、0.49、0.36、2.24、4.07 μmol·L-1;根据最小赤池信息量准则(AIC)和施瓦茨信息准则值(SC)即为最佳模型的原则,补骨脂二氢黄酮和异补骨脂查尔酮对CYP1A1的抑制为竞争性抑制,Ki常数分别为0.12、0.23 μmol·L-1;补骨脂定对CYP1A1表现出非竞争性抑制,抑制常数Ki为0.59 μmol·L-1;分子对接结果显示,补骨脂二氢黄酮和异补骨脂查尔酮与CYP1A1蛋白之间均能产生氢键、π-π键以及疏水作用,结合自由能分别为-10.145、-8.286 kcal·mol-1(1 kcal=4.2 kJ),这可能是它们与CYP1A1亲和力较强进而产生强抑制活性的原因.结论 补骨脂富含的异戊烯基成分是CYP1A1强抑制剂(IC50＜5 μmol·L-1);异戊烯基成分C环1位和2位脱水开环会增加对CYP1A1的抑制活性;A环C-6位异戊烯基取代的化合物比C-8位取代的化合物表现出更强的CYP1A1抑制活性;A环7-OH甲基化会减弱CYP1A1的抑制活性;分子对接结果也证实了补骨脂二氢黄酮和异补骨脂查尔酮与CYP1A1有较强的亲和力.