CD19嵌合抗原受体T细胞靶向B细胞肿瘤细胞株过程中糖皮质激素对其扩增影响的体外研究

目的:评估糖皮质激素对CD19嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞）靶向杀瘤过程中增殖的影响。方法:健康志愿者的外周血单个核细胞（PBMC）作为T细胞来源，经CD3磁珠分选及CD19 CAR慢病毒转染制备CD19 CAR-T细胞；采用流式细胞术（FCM）测定CD19 CAR-T细胞转染率及其在培养体系中所占比例；采用CFDA SE细胞增殖示踪荧光探针试剂标记CD19 CAR-T细胞后测定其荧光强度；LDH细胞毒性检测方法检测不同浓度的糖皮质激素对B细胞肿瘤细胞株杀伤活性的影响。结果:①CD19 CAR-T细胞CD19 CAR转染率为（51.34±5.28）%。②24 h后不同剂量甲泼尼龙对Nalm6、Pfeiffer及U2932细胞的杀伤活性高于地塞米松，48 h后低浓度（4 mg/ml）甲泼尼龙对Nalm6、Pfeiffer、U2932细胞杀伤活性高于低浓度（0.75 mg/ml）地塞米松，而高浓度（12 mg/ml）甲泼尼龙杀伤活性低于高浓度（2.25 mg/ml）地塞米松。但各个时间不同剂量甲泼尼龙组对EHEB细胞的杀伤活性均低于对应时间、剂量的地塞米松。③CD19 CAR-T细胞在不同浓度糖皮质激素作用下的比例及平均荧光强度比较，地塞米松对CD-19 CAR-T细胞的增殖抑制作用强于甲泼尼龙，两种糖皮质激素的高浓度组较低浓度组对CD19 CAR-T细胞的增殖抑制作用更明显。④CD19 CAR-T细胞与不同肿瘤细胞共培养体系中，其比例及平均荧光强度比较，地塞米松对CD19 CAR-T细胞的增殖抑制作用强于甲泼尼龙，两种糖皮质激素的高浓度组较低浓度组对CD19 CAR-T细胞的增殖抑制更明显。结论:CD19 CAR-T细胞靶向不同肿瘤细胞株过程中地塞米松对CD19 CAR-T细胞的扩增和增殖抑制作用大于甲泼尼龙，高剂量组该抑制作用更加明显。