利用膜片钳技术标记脑片神经元的方法

黄燕云,杜相欣,李建国,郭霞,张雨彤,郝娜,高洁,张宇,张利娜

Zhongguo ying yong sheng li xue za zhi = Zhongguo yingyong shenglixue zazhi = Chinese journal of applied physiology（2021）

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摘要

目的:介绍一种利用膜片钳技术标记脑片神经元形态的方法.方法:利用振动切片机切好实验目标部位的脑片,用含有NeurobiotinTM Tracer的电极内液灌注玻璃微电极,并进行全细胞膜片钳记录;实验结束后将脑片先用4％多聚甲醛固定、漂洗,再用含有Streptavidin-Texas Red和Triton X-100的PB染色,2h后即可用荧光显微镜观察着色的神经元.结果:将细胞膜电压钳制在-70 mV,阶跃刺激后神经元表现为逐渐增大的膜电流.电流钳模式记录时,阶跃刺激使神经元去极化,达到阈电位后爆发动作电位.荧光显微镜下可看到胞体和主要突起清晰完整的神经元形态.结论:本方法适用于在膜片钳实验后观察所记录的神经元的形态特征,操作方便,图像直观清晰.

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关键词

brain slices,fluorescence tags,neuronal morphology,whole-cell patch clamp

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