Réactivité croisée du néfopam avec différents kits immunochimiques de dépistage de benzodiazépines: étude comparative.

Objectif Mise en evidence d’une interference analytique impliquant le nefopam et ses metabolites (desmethylnefopam et nefopam-N-oxyde) lors du depistage urinaire de benzodiazepines par immunochimie sur les kits EMIT Atellica CH (Siemens Healthcare), EMIT Architect (Abbott Diagnostics) et CEDIA Thermo Fisher sur Cobas (Roche Diagnostics). Methode Une femme de 58 ans s’est presentee aux urgences pour malaise associe a des vomissements et des troubles neurologiques. Dans ses antecedents, un episode semblable avait ete attribue a un mesusage de benzodiazepine. Le depistage urinaire de benzodiazepine par immunochimie a ete effectuee et s’est avere positif (kit Enzyme Multiplied Immunoassay Technique (EMIT) Atellica CH Benzodiazepine). Un criblage par CL- BD (UPLC Waters Acquity HClass Plus) a donc ete realise pour identifier la benzodiazepine incriminee : seuls le nefopam et ses metabolites ont ete mis en evidence. L’absence de benzodiazepine a ete confirmee par un criblage cible en CL-SM/SM (APi 3200QTRAP Sciex), apres hydrolyse enzymatique des urines. Pour evaluer l’interference possible du nefopam, plusieurs surcharges urinaires d’une solution de nefopam (187,5, 375, 750, 1500, 3000 ng/mL) ont ete analysees par immunochimie sur le kit EMIT Atellica CH Benzodiazepine. Ensuite, des echantillons urinaires issus du soin quotidien ont ete selectionnes de la facon suivante : trois controles nefopam positifs (patients traites par nefopam), deux controles nefopam negatifs (patients non traites par nefopam). L’absence de benzodiazepine a ete confirmee par les deux methodes chromatographiques precedemment citees. Les concentrations de nefopam urinaire ont ete determinees par CL-BD (UPLC Waters Acquity HClass Plus). Enfin, une etude comparative des depistages immunochimiques a ete realisee avec ces memes prelevements (EMIT Atellica CH Benzodiazepine, EMIT Multigent Benzodiazepines sur Architect c8000 et Cloned Enzyme Donor Immunoassay (CEDIA) Benzodiazepines de Thermo Scientific sur Cobas). Resultats Tous les echantillons urinaires surcharges en nefopam ont conduit a un depistage negatif par immunochimie (kit EMIT Atellica CH Benzodiazepine). La reactivite croisee observee a ete confirmee pour deux des trois echantillons du groupe controle nefopam positif avec des resultats dans la zone grise en EMIT Architect. Les depistages par CEDIA sur Cobas sont tous revenus negatifs. Les concentrations de nefopam mesurees etaient de 1219 ng/mL pour l’echantillon urinaire de la premiere patiente, 132, 15 et Conclusion Nos resultats sont coherents avec des donnees rapportes precedemment : chez trois volontaires ayant recu du nefopam, plusieurs depistages se sont averes positifs tandis que des urines temoins surchargees a differentes concentrations allant de 5 a 1000 μg/mL avaient presente des resultats negatifs (El-Haj B et al, J Anal Toxicol. 2008 ;32 :790–792). Nous avons donc montre que la presence de nefopam peut etre responsable d’une interference analytique sur plusieurs kits immunochimiques de depistage urinaire de benzodiazepines. La reactivite croisee mise en evidence ici est probablement liee a un ou plusieurs metabolites du nefopam. D’autres travaux seront necessaires pour identifier ce ou ces metabolites. Devant l’heterogeneite des interferences generees, il conviendrait d’evaluer chaque kit disponible au cas par cas et ainsi satisfaire aux exigences de maitrise des risques lors de l’etablissement du dossier de validation de methode.