家蚕质多角体病毒RDRP的免疫电镜定位研究

JOURNAL OF CHINESE ELECTRON MICROSCOPY SOCIETY(2005)

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摘要
以原核表达BmCPV-RDRP重组蛋白为抗原制备的兔抗血清为一抗,直径15 rm山羊抗兔IgG-胶体金为二抗.应用3%多聚甲醛-0.1%戊二醛混和固定液、K4M低温包埋剂和紫外光聚合制备的样品进行免疫电镜观察,结果感染BmCPV(C)病蚕的中肠柱状细胞中,游离和病毒多角体中BmCPV的病毒粒子均能结合胶体金颗粒,平均标记率为25%左右,认为BmCPV(C)-RDRP基因编码的蛋白应为BmCPV病毒的结构蛋白,位于病毒的衣壳上.其中一抗的使用浓度为1:200,二抗的使用浓度为1:40,可以获得较好的免疫标记效果和较少的非特异性标记.
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