苯并[a]芘(BaP)对褐菖鲉(Sebasticus marmoratus)肝CYP1A1酶活性、基因表达及蛋白表达的影响

为了了解苯并[a]芘(BaP)对鱼类细胞色素P4501A1(CYP1A1)表达的影响,以褐菖鲉(Sebasticus marmoratus)为实验材料,采用体内实验,研究其在经过不同浓度(0.1、1、10、20、50mg/kg鱼体重量)的BaP诱导后,鱼体肝脏研究CYP1A1基因表达的情况,筛选出后续时间-效应实验中BaP注射的最佳浓度,研究BaP诱导6h、12h、1d、3d、7d后(质量浓度为20mg/kg鱼体重量)鱼体肝脏CYP1A1酶活性、基因表达和蛋白表达的情况.结果表明:剂量-效应实验中,20mg/kg鱼体重量为最佳浓度,此浓度下,基因表达在各组中变化最显著.时间-效应实验中,较空白对照组而言,染毒6h、12h和1d后,EROD酶活性显著增加.3d后开始下降,与对照组相比变化不大,7d后酶活性又发生上调.半定量RT-PCR结果表明,各染毒组与对照组相比,CYP1A1基因表达量都发生了上调,呈现先上升后下降的趋势.其中,6h和12h组相对表达量极显著增加,1d后开始下降且与3d和7d组相比变化不明显.Western b1ot结果表明,蛋白表达量在染毒12h后表现出显著的诱导效应,随着时间的延长略有回落,但与对照组相比仍有显著性差异.研究表明:BaP对褐菖鲉CYP1A1具有较强的诱导作用.一定质量浓度的BaP注射于褐菖鲇不同的时间后,能诱导褐菖鲉活体EROD酶活性、CYP1A1基因mRNA表达及蛋白表达,并随着时间的延长呈现先诱导后抑制的趋势.这说明BaP作为诱导剂对CYP1A1酶活性和蛋白表达的作用机制可能与调控CYP1A1的转录水平有关.