凯氏拟小球藻己糖激酶基因的克隆及其在不同培养条件下的表达分析

Marine Sciences(2017)

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摘要
为研究凯氏拟小球藻(Parachlorella kessleri)糖代谢分子机制,本研究采用RT-PCR和RACE技术从凯氏拟小球藻中克隆了己糖激酶基因CkeHK(GenBank ID: AHF54566),并对其自养、异养、混养条件下的转录表达进行分析.结果表明, 该序列的cDNA全长为1844 bp, 开放阅读框1389 bp, 编码462个氨基酸.该蛋白的相对分子质量为49.73, 等电点为6.98.实时荧光定量PCR结果显示, 以自养培养条件为对照,异养培养和混养培养条件下,CkeHK 均能够发生明显上调,且混养条件下上调量比异养条件下上调量更多,说明CkeHK可能在凯氏拟小球藻利用外源糖的过程发挥重要作用,并且光信号对于凯氏拟小球藻利用外源糖可能存在调控作用.这些研究结果为进一步阐明CkeHK的功能及其作用机制奠定了分子基础.
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关键词
Parachlorella kessleri,hexokinase,molecular clone,transcript expression
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