苹果MpMYB96基因克隆和功能鉴定

MpMYB96是拟南芥(Arabidopsis thaliana) AtMYB96的一个同源基因.为了探究MpMYB96在苹果(Malus pumila)中的功能,本文以‘皇家嘎拉’苹果苗的cDNA为模板进行PCR扩增,获得一个约1 000 bp的目的条带,通过测序发现该基因长为1 029 bp,序列与MpMYB96 (MDP0000144744,https://www.rosaceae.org/)的序列一致,该蛋白序列含有两个SANT保守结构域.进化树分析了15个物种MYB96蛋白的亲缘关系,表明MpMYB96在不同物种中的功能是保守的.此外,结果发现苹果MpMYB96与白梨(Pyrus bretschneideri) PbMYB96的亲缘关系最近,说明MpMYB96和PbMYB96可能具有相同的功能.实时荧光定量PCR发现MpMYB96在花中表达量最高,茎中表达量次之,根和叶中表达量均较低,暗示MYB96可能在花中扮演更重要的角色.MpMYB96的表达受脱落酸(ABA)、聚乙二醇(PEG)、水杨酸(SA)处理的诱导,表明MpMYB96的功能可能涉及到了ABA和SA以及PEG模拟的干旱过程.将MpMYB96转化苹果愈伤组织,检测转基因愈伤的表型,发现MpMYB96过表达能够增加植物对ABA和PEG的敏感性,并且能够对轮纹病产生一定的抵抗能力.