人博卡病毒2型VP1U突变对sPLA2活性的影响

对HBoV2 VP1U蛋白进行原核表达并检测其sPLA2活性,对其关键氨基酸进行突变,检测突变对sPLA2活性的影响.构建重组质粒pMD18T-VP1U,选取VP1U蛋白4个关键氨基酸为突变点,分别进行原核表达,蛋白纯化后用sPLA2试剂盒检测sPLA2活性,对比突变前后VP1U蛋白sPLA2活性有无变化.野生型HBoV2 VP1U蛋白的sPLA2活性为0.243μmol/min/mL,具有sPLA2活性;突变体L19P、P21R、D42H及Y45N蛋白的sPLA2活性分别为野生型蛋白的1.2％、1.2％、0.82％、0.41％.野生型HBoV2 VP1U蛋白具有sPLA2活性,突变体蛋白均几乎完全丧失了sPLA2活性,提示19、21、42、45位4个氨基酸是维持sPLA2活性的关键氨基酸.该研究为靶向抗病毒药物的研究提供了理论基础.