西尼罗病毒的逆转录重组酶介导扩增检测方法

[背景]随着西尼罗热在全球范围内广泛流行,西尼罗热传入我国的风险加大.研究西尼罗病毒的快速检测方法,为西尼罗病毒检测建立方法储备.[目的]建立西尼罗病毒逆转录重组酶介导扩增(reverse transcription recombinase aided amplification,RT-RAA)检测方法.[方法]根据西尼罗病毒基因保守区序列设计引物和探针,建立西尼罗病毒RT-RAA检测方法,并评价该方法的重复性、特异性和灵敏度.[结果]RT-RAA方法的整个扩增反应过程温度恒定,反应温度为39℃,检测时间较短(20 min内),并且检测限可达10 copies,与基孔肯雅病毒、登革病毒、乙型脑炎病毒、黄热病毒等蚊媒病毒无交叉反应,具有良好的特异性,样本检测符合预期.[结论]建立的西尼罗病毒RT-RAA方法具有快速、特异以及灵敏的特点,可用于西尼罗病毒的口岸快速检测和流行病学监测.