气味结合蛋白MmedOBP19在中红侧沟茧蜂足部的表达及配体结合特征

Acta Entomologica Sinica(2017)

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摘要
[目的]明确气味结合蛋白基因MmedOBP19在中红侧沟茧蜂Microplitis mediator足部的表达定位及重组MmedOBP19的配体结合特征.[方法]利用扫描电镜观察化学感器在中红侧沟茧蜂足部的分布,通过原位杂交研究MmedOBP19在中红侧沟茧蜂雌蜂前足中的表达定位,并采用荧光竞争结合实验分析MmedOBP19重组蛋白与86种潜在配体的结合特征.[结果]扫描电镜观察发现,中红侧沟茧蜂的足部主要分布3种类型的感器,分别是毛形感器、刺形感器和锥形感器.原位杂交结果显示,MmedOBP19的表达主要集中在中红侧沟茧蜂前足跗节的感器下方.重组MmedOBP19与配体的结合力测定结果显示,MmedOBP19与非挥发性植物次生物质包括棉酚(Ki =2.32 ±0.17μmol/L)、硫酸黄连素(Ki=4.86±1.81 μmol/L)、槲皮素(Ki=4.93±0.21 μmol/L)、单宁(Ki=5.23±0.38 μmol/L)、芸香叶苷(Ki=5.91±0.26 μmol/L)和奎宁(Ki=6.05±0.51 μmol/L)等具有较强的结合能力,同时能够结合油酸(Ki=4.32±1.73 μmol/L)及亚油酸(Ki =3.55 ±0.44μmol/L),但与柠檬烯(Ki=12.65±2.55 μmol/L)的结合力较弱.[结论]推测中红侧沟茧蜂足部具有化学感受功能,MmedOBP19主要参与中红侧沟茧蜂足部味觉识别过程.
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关键词
sensilla,odorant binding protein,fluorescence-based competitive binding assay,ultrastructure,Microplitis mediator,chemoreception,in situ hybridization
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