利用大型天然噬菌体抗体库筛选抗死亡受体5人源抗体
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology（2015）
摘要
目的 从大容量天然噬菌体抗体库中筛选抗人死亡受体5(DR5)单链抗体(scFv)并对其抗原结合活性进行鉴定.方法 以前期真核表达纯化的DR5-Fc蛋白包被筛选管,从自主构建的大容量天然噬菌体抗体库中,通过4轮筛选过程获得噬菌体抗体,采用免疫细胞化学染色、ELISA鉴定其抗原结合活性;DNA指纹图谱分析和序列测定确定其抗体类型.结果 经过4轮筛选,获得26株与DR5特异性结合的阳性克隆,DNA指纹分析有4种不同的可变区片段;经过基因测序,分析可变区基因的亚群,并将其制备成可溶性的抗体,进一步用免疫细胞化学技术证实所获得的抗体可特异性结合SW480细胞的DR5蛋白.结论 利用噬菌体抗体库技术成功获得了特异性抗DR5的人源性scFv.
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