MiR-320a在肝癌中的表达及对SMMC-7721肝癌细胞凋亡和迁移的影响

本研究以miR-320a 在肝癌组织中的表达水平及其对肝细胞肝癌SMMC-7721 细胞株凋亡和迁移的影响为目的.通过收集18 例肝癌及癌旁组织用定量逆转录- 聚合酶链反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction, qRT-PCR)方法检测miR-320a 在癌组织和癌旁组织中的差异性表达.提取正常肝细胞HL-7702 与肝癌细胞SMMC-7721,Hep3B 的RNA,用qRT-PCR 检测miR-320a 在正常肝细胞与肝癌细胞中的表达差异性.SMMC-7721 细胞株进行miR-320a agomir 特殊化学修饰激动剂转染,用 qRT-PCR 检测细胞转染效率.用划痕实验检测转染前后的SMMC-7721 细胞株的迁移能力.用流式细胞学技术检测miR-320a 对SMMC-7721 细胞凋亡和周期的影响.用Western blotting 检测过表达miR-320a 对肝癌细胞凋亡和迁移机制的研究.从而发现在肝癌标本中,与癌旁组织比较miR-320a 表达下调;正常肝细胞作为对照,miR-320a 在SMMC-7721 细胞株中表达下调明显;划痕实验显示过表达miR-320a 可明显抑制肝癌细胞的迁移;流式细胞术分析,过表达miR-320a 通过将细胞阻滞在G0 期/G1 期从而明显促进肝癌细胞的凋亡.得到了miR-320a 在肝癌细胞及肝癌标本中表达水平较低;上调肝癌细胞内miR-320a 水平能通过下调周期蛋白Cyclin D1 的表达,将细胞周期阻滞在G0 期/G1 期,同时下调凋亡相关蛋白Caspase3 及 Bcl-2、上调Bax,破坏Bcl-2/Bax 的比例,促进肝癌细胞的凋亡,并通过下调基质金属蛋白酶MMP9 的表达抑制肝癌细胞的迁移能力的结论.