适于基因组测序的高纯度的大豆线粒体基因组DNA提取方法

Yuqiu Li,Chunbao Zhang,Hongkun Zhao,Hua Tan, Xiaoyan Fei,Limei Zhao,Yingshan Dong

Genomics and Applied Biology（2015）

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摘要

为满足高通量二代测序要求,本研究采用大豆黄花苗为试材,结合差速离心、蔗糖密度梯度离心及超速离心方法提取高纯度大豆线粒体基因组DNA (mtDNA).结果表明,差速离心能够有效去除核基因组掺杂;超速离心与蔗糖密度梯度离心结合能够有效去除叶绿体污染.提取的mtDNA经琼脂糖凝胶电泳、紫外光度计检测及叶绿体和细胞核特异性引物检测表明,该方法提取的大豆mtDNA无叶绿体DNA及核DNA污染,且纯度高,可满足测序等对线粒体高纯度的要求,为研究大豆线粒体相关性状的机理奠定了坚实基础.

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