重组蛋白CTB-P97R1对猪支原体肺炎活疫苗滴鼻免疫效果的评价

为提高滴鼻免疫条件下猪支原体肺炎活疫苗的免疫效果,本研究设计引物扩增猪肺炎支原体P97R1基因,融合至霍乱毒素B亚单位(CTB)基因下游,构建了重组质粒pET-CTB-P97R1.重组菌经IPTG诱导表达、分离纯化得到rCTB-P97R1重组蛋白.利用体外神经节苷脂(GM1)结合试验检测rCTB-P97R1的佐剂活性.随后将rCTB-P97R1与活疫苗混合后滴鼻免疫小鼠,免疫后采血和收集小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),分别检测其中的特异性IgG抗体和sIgA抗体的水平评价免疫效果.结果 显示,rCTB-P97R1可以特异性结合GM1,具有生物学活性.小鼠免疫后的血清IgG抗体显著高于活疫苗对照组(p＜0.01),同时产生了高水平的P97R1特异性IgG抗体(p＜0.01);小鼠BALF中的sIgA抗体也显著高于活疫苗对照组(p＜0.05).结果 表明,rCTB-P97R1能够显著增强经滴鼻免疫的猪支原体肺炎活疫苗的免疫效力,同时可提升P97R1的免疫应答,有望作为经黏膜免疫的猪支原体肺炎活疫苗的新型佐剂.