鸭源鸡杆菌gtxA/flfA基因双缺失株的构建及其生物学特性分析

为了解RTX样毒素GtxA及F-17菌毛的flfA基因在鸭源鸡杆菌中的功能,本研究利用自然转化法对鸭源鸡杆菌RZΔgtxA进一步缺失flfA基因构建RZΔgtxAΔflfA菌株,通过分析其生长特性、 生物被膜形成能力、 黏附能力及对细胞毒性的变化,探究其与鸭源鸡杆菌致病性可能的关系.结果显示,RZΔgtxAΔflfA能稳定遗传flfA基因的缺失;单双基因突变株溶血活性均消失,但二者菌落形态及生长速率并未出现显著改变;二者生物被膜形成能力均明显下降(p<0.001),但RZΔgtxAΔflfA相比RZΔgtxA生物被膜形成能力稍有增强但差异不显著;二者对鸡原代输卵管上皮细胞的黏附能力及毒性均减弱(p<0.05),且RZΔgtxAΔflfA对细胞的黏附能力减弱更明显(p<0.01).以上结果表明,GtxA毒素和F-17菌毛在鸭源鸡杆菌黏附及对鸡原代输卵管上皮细胞的毒力中起重要作用,且呈现明显的协同关系.本研究为鸭源鸡杆菌致病机理的探究奠定基础.