LncRNA SPRY4-AS1通过糖酵解调控肝癌细胞的增殖与凋亡

长非编码RNAs (lncRNAs)在转录水平和转录后水平均对细胞的多种功能发挥重要的调节作用.大量研究已经表明,lncRNAs在肿瘤细胞的糖代谢过程中发挥了不可忽视的作用.然而,其具体的机制仍需进一步探究.该文研究了lncRNA SPRY4-AS1通过糖代谢调控人肝癌细胞(HepG2细胞和Huh7细胞)体外增殖与凋亡的影响及其相关机制.首先,利用TCGA数据库预测了SPRY4-AS1的表达对肝癌患者生存率的影响.进而通过siRNA或慢病毒载体构建SPRY4-AS1的HepG2细胞或Huh7细胞的低表达株和高表达株探究其机制.并通过CCK-8、流式细胞仪(FCM)、细胞耗氧率(OCR)、Western印迹和荧光定量PCR等方法,分别检测细胞的体外增殖能力、细胞周期变化及凋亡相关蛋白质水平的变化与糖酵解能力的变化,同时也检测了IRS-1、AKT和PI3K磷酸化基因在蛋白质水平的表达量.结果 表明,促进lncRNA SPRY4-AS1的表达可以提高肝癌患者的生存能力,并对其机制进一步探究发现:与对照组(si-NC)相比,实验组(si-lncRNASPRY4-AS1)细胞增殖能力明显增强(P＜0.05),而在过表达细胞中,细胞增殖能力明显下降(P＜0.05).此外,在过表达lncRNA SPRY4-AS1的细胞中,S期细胞所占比例显著减少(P＜0.05),G2/M期细胞比例增加(P＜0.05),Bcl-2基因在蛋白质水平的表达量降低,Cytc基因在蛋白质水平的表达上升.在低表达lncRNA SPRY4-AS1细胞中,PI3K/AKT信号通路被激活;而过表达细胞中,PI3K/AKT信号通路被抑制.然而,细胞胞外产酸能量增强,HK与PFK的mRNA表达量上升(P＜0.05),并且酶活显著增强(P＜0.05).综上所述,lncRNA SPRY4-AS1可以通过抑制PI3K/AKT信号通路,降低糖酵解水平,导致其凋亡,从而抑制细胞的增殖,延缓肝癌患者的寿命.