miR-199b-3p通过靶向PLCε抑制前列腺癌细胞的恶性增殖

该研究的目的是确定miR-199b-3p在前列腺癌(PCa)中的表达及其对PCa细胞增殖的影响及作用机制.通过实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-199b-3p在PCa组织、良性前列腺增生(BPH)组织、PCa细胞及人正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)中的表达,并分析其表达与PCa临床病理特征的关系.蛋白质印迹法(Western blot)用于检测磷脂酰肌醇特异性磷脂酶Cepsilon(PLCε)的表达.采用CCK-8法和克隆形成实验对其体外增殖进行评估.Edu测定法用于检测细胞对Edu的吸收.荧光素酶报告实验被用来验证miR-199b-3p和PLCε的靶向结合情况.结果 显示,在PCa组织中miR-199b-3p的表达水平明显低于BPH组织,且与临床病理特征中的组织学分期相关.上调miR-199b-3p可以显著抑制PCa细胞的增殖和Edu的摄取能力,PLCε被鉴定为miR-199b-3p的下游靶基因,且其表达量与miR-199b-3p的表达量呈负相关.此外,补救实验结果显示,上调PLCε能够逆转miR-199b-3p在PCa细胞增殖中的抑制作用.总之,miR-199b-3p可通过靶向PLCε3'非编码区(3'-UTR)负性调控PLCε进而抑制PCa细胞的恶性增殖.