马抗中东呼吸综合征冠状病毒特异性F(ab')2的制备

目的 采用免疫亲和层析技术纯化制备马抗中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)特异性IgG与F(ab')2.方法 以经MERS-CoV病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)对马匹进行多次免疫所制备的高免血清为原料,原核表达的MERS-CoV刺突蛋白S受体结合域(S-receptor binding domain,S-RBD)为抗原蛋白制备免疫亲和柱,提取制备抗原特异性IgG或F(ab')2.间接ELISA法检测各样品的活性,MERS假病毒中和试验检测样品的中和活性,BCA法测定样品的浓度,并计算收率.结果 所制备的特异性IgG与特异性F(ab')2的纯度分别为90.1％和92.8％,收率分别为8.7％和3.07％;在相同的浓度下,所制备的特异性IgG或F(ab')2的活性和中和活性均高于对照组中的血清总IgG或总F(ab')2.结论 成功制备了马抗MERS-CoV特异性IgG或F(ab')2,为建立更加安全与高效的抗MERS-CoV免疫球蛋白F(ab')2制备工艺奠定了基础.