IBRV TaqMan-MGB实时荧光定量PCR方法在BVDV和IBRV共感染中病毒定量检测的应用

目的 应用牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)TaqMan-MGB实时荧光定量PCR方法进行牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)和IBRV共感染的病毒定量检测,进一步研究BVDV和IBRV共感染后BVDV对IBRV复制的影响.方法 分别用0.2和1.0 MOI的BVDV感染MDBK细胞,待细胞出现50％ CPE时,再用0.1 MOI的IBRV共感染,作用24 h后收集样品,采用Taqman-MGB实时荧光定量PCR方法检测IBRV的拷贝数,并与对照组(IBRV单独感染组)进行比较.结果 在先感染0.2和1.0 MOIBVDV情况下,IBRV拷贝数分别为3.0× 106和6.47×106拷贝/μL,单独感染IBRV的对照组的拷贝数为1.15×107拷贝/μL.结论 在体外情况下,BVDV对IBRV的复制影响较小,为研究BVDV和IBRV的共感染机制以及制备BVDV和IBRV感染同一细胞的二联苗奠定了基础.