人纤溶酶原饼环区5蛋白的原核表达体系的建立
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS（2005）
摘要
目的构建人纤溶酶原饼环区5(hPK-5)蛋白原核表达载体,并进行表达和鉴定,为获取大量高纯度、具有生物活性的hPK-5蛋白奠定基础.方法以纤溶酶原cDNA为模板,PCR扩增hPK-5基因,经酶切后构建表达载体pBV220/hPK-5,转入大肠杆菌JM109进行温控诱导表达,表达产物经纯化、复性后,检测其抑制鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管新生的生物学活性.结果带有pBV220/hPK-5的大肠杆菌表达的目的蛋白占菌体总蛋白的34.8%,其表达蛋白具有His-tag抗原活性和野生活性.结论已成功构建了pBV220/hPK-5重组质粒,并在大肠杆菌中获得高效表达.
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