毕赤酵母表达环状芽胞杆菌壳聚糖酶及其 水解产物组成与结构分析

Chinese Journal of Bioprocess Engineering(2019)

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摘要
壳寡糖具有抗炎、抗肿瘤及激活植物免疫等一系列生物活性,这些生物活性的发挥与其结构直接相关.为最大程度发挥壳寡糖的生物活性并确定其结构与功能关系,有必要制备不同结构特征的壳寡糖.笔者优化并全基因合成环状芽胞杆菌壳聚糖酶基因,利用毕赤酵母进行分泌表达;用该酶水解制备低脱乙酰度壳寡糖,使用超高效液相色谱四极杆飞行时间质谱对其组分进行分离及鉴定,使用核磁共振确定其末端结构特征.结果表明:所得壳聚糖酶蛋白质量浓度达0.77 mg/mL,水解产物中包含至少37种不同的壳寡糖组分,这些组分的还原末端主要由氨基葡萄糖组成,非还原末端同时包含氨基葡萄糖及N乙酰氨基葡萄糖.本研究为壳寡糖结构与功能关系的阐释奠定基础.
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