利用酵母双杂交技术筛选人PROKR2蛋白C端相互作用蛋白

目的:利用酵母双杂交技术从人cDNA文库中筛选人前动力蛋白受体2(hPROKR2)C端相互作用蛋白.方法:复苏酵母菌Y2HGold-hPROKR2-C,与人cDNA文库杂交,计算杂交效率;筛选相互作用克隆并测序,寻找hPROKR2蛋白C端相互作用蛋白;通过在DDO/X、QDO/A/X平皿上划线,对筛选到的人cDNA文库质粒的自活性进行验证;采用GST pull down进一步验证两者之间的相互作用.结果:酵母双杂交实验的杂交融合效率为1.375x108;在人cDNA文库中筛选出hPROKR2蛋白C端相互作用蛋白SNAPIN,GST pull down实验证实两者之间存在相互作用.结论:SNAPIN可与hPROKR2蛋白C端结合.