HAV抗原检测ELISA试剂盒的验证及应用

目的 验证甲型肝炎灭活疫苗(人二倍体细胞)(甲肝疫苗)生产场地变更后原生产场地制备的ELISA试剂盒对HAV抗原检测的一致性.方法 用原生产场地制备的抗HAV多克隆抗体包被的酶标板 、辣根过氧化物酶标记的抗HAV抗体制备ELISA试剂盒,并对该试剂盒进行线性 、精密度 、准确度 、专属性和稳定性验证,同时用该试剂盒检测甲肝疫苗中间品的HAV抗原浓度,考察其适用性.结果 在新生产场地中ELISA试剂盒的检测线性范围为0.2～6.4 IU/ml,线性决定系数大于0.99.该试剂盒的精密度良好,检测结果的变异系数均小于15％.不同HAV抗原浓度样品的回收率为84％ ～104％.该试剂盒可特异性检测HAV,不与非HAV及HAV培养基质发生反应.包被抗体的酶标板于37℃ 放置7 d对检测结果没有影响.该试剂盒检测结果显示,HAV收获液 、HAV纯化液和甲肝疫苗半成品的平均HAV抗原浓度分别为213.25、146.70和48.91 IU/ml,符合在生产过程中HAV抗原含量下降的规律.结论 原生产场地制备的ELISA试剂盒可用于检测新生产场地生产的甲肝疫苗.