低浓度双酚A对小鼠睾丸支持细胞的损伤作用 及机制研究

目的:观察低浓度双酚A(BPA)对小鼠睾丸支持细胞存活率的影响,并探讨其机制.方法:使用DMEM/F12培养液培养小鼠睾丸支持细胞TM4细胞系传代增长至对数期时经不同剂量BPA染毒2 h、8 h,MTT法检测细胞存活率、微量酶标法检测LDH活性、ELISA法检测囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)与痛敏肽的表达水平、免疫印迹法检测CREB表达水平.采用方差分析比较不同BPA浓度、染毒时间的效应.结果:与对照组相比,BPA染毒组睾丸支持细胞存活率均显著降低(χ2=28.6,P<0.01),1000μg/mL、24 h染毒组的细胞存活率下降约85％;LDH活性在5μg/mL、2 h染毒组中下降约69％,与5μg/mL、2h染毒组相比10μg/mL、2h染毒组中LDH活性上升约175％;而CFTR表达水平、痛敏肽表达水平、CREB表达水平均无明显差异.结论:低浓度BPA降低小鼠睾丸支持细胞存活率,可能通过下调支持细胞内CREB表达,干扰P-CREB对细胞的调控作用,降低对精子细胞的支持作用.