毒力基因pspA在肺炎链球菌入侵血液系统中的作用研究

Chinese Journal of Nosocomiology(2014)

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摘要
目的:研究不同来源肺炎链球菌(SPN)刺激THP-1细胞和A549细胞前、后毒力基因 pspA表达的变化,探讨其在SPN入侵血液中的作用。方法从住院患者分离、搜集23株SPN ,与SPN标准株ATCC49619一起进行培养,并提取RNA ;T HP-1和A549细胞经培养后调至一定浓度,再分别用上述24株SPN在37℃5% CO2环境下分别刺激4 h和8 h;然后,搜集细胞悬液进行离心,沉淀物用于RNA的提取;用荧光实时定量逆转录PCR法对刺激前、后毒力基因 pspA的mRNA与16s rRNA进行同时测定,用SPSS17.0软件进行数据分析。结果临床SPN刺激THP-1和A549细胞后毒力基因 pspA的△Ct值均低于刺激前;临床SP株毒力基因 pspA的△Ct值与ATCC49619间,血源性和痰源性SPN相比,刺激细胞后 psaA的△Ct值间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论临床SPN刺激T HP-1和A549细胞后毒力基因 pspA的表达均有上调,临床SPN株毒力基因 pspA的表达与ATCC49619不同;毒力基因 pspA表达的异化可能是血源性SPN入侵血液的原因之一。
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关键词
Streptococcus pneumoniae,Reverse transcription PCR,Virulence gene
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