蜡样芽胞杆菌快速检测及其毒力基因筛选

目的 筛选蜡样芽胞杆菌鉴定基因和快速检测毒力基因.方法 选择分离自食品和土壤的代表性蜡样芽胞杆菌共329株,聚合酶链式反应(PCR)方法检测gyrB和groEL基因的种特异性,检测毒力基因在菌株中的分布特征.基于检测结果,用多重PCR检测方案快速检测蜡样芽胞杆菌鉴定基因及其毒力因子.结果 在蜡样芽胞杆菌及其近缘芽胞杆菌中,除1株苏云金芽胞杆菌扩增阳性外,gyrB基因具有蜡样芽胞杆菌种特异性;而groEL基因在4种芽胞杆菌中均有扩增.6种毒力基因nheA、entFM、bceT、hblC、cytK和ces的携带率分别为84.19％、79.64％、49.24％、47.72％、47.11％和1.52％.选择nheA、hblC、entFM、ces、cytK和gyrB用于快速鉴定蜡样芽胞杆菌及其毒力基因,获得了双重PCR扩增体系(gryB和cytK)与4重PCR扩增体系(nheA、hblC、entFM和ces)的最佳检测方案.结论 筛选的蜡样芽胞杆菌鉴定基因和毒力基因能够全面、特异、简便、高效地检测蜡样芽胞杆菌,可为食品安全检测及快速诊断提供依据,在实际检验工作中具有良好的应用前景.