低温海水浸泡对大鼠血浆蛋白质组的影响研究

目的 模拟海难落水所致重度低体温损伤,比较鉴定低温海水浸泡模型动物血浆蛋白质组差异,为研究低体温相关血浆蛋白提供线索.方法 将50只雄性健康Wistar大鼠平均分成5组,分别在低温海水中浸泡0、2、4、6、10 h后采集下腔静脉血.分离血浆后,用试剂盒去除IgG和白蛋白等高丰度蛋白,并经过除盐后采用蛋白质双向凝胶电泳(2-DE)分离.对差异1.5倍以上的蛋白斑点,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行肽质量指纹图谱分析,应用NCBI或Swiss-prot数据库鉴定差异蛋白质.结果 大鼠浸泡在15℃海水中,中心体温(肛温)迅速下降,浸泡30 min降至19℃,浸泡120 min降至16℃左右,体温维持不变,说明进入重度低体温状态.初步鉴定出3个与低温相关差异蛋白,肺表面相关蛋白A(SP-A)、丝氨酸蛋白酶抑制剂A3K(SPA3K)和抑制物组织基质金属蛋白酶抑制剂-3(TIMP-3).与正常大鼠相比,这3个蛋白的表达水平均随着低温海水浸泡时间的延长明显上调.结论 低温海水浸泡后的大鼠血浆蛋白质组相对正常大鼠血浆蛋白质组有改变.研究差异蛋白有助于阐明低温损伤的分子机制,为研究和治疗低体温症提供靶标.