双重聚合酶链式反应快速筛查副溶血性弧菌流行株方法应用与评价

目的 基于种属特异性tlh基因和典型毒力基因(tdh1 _368特异性位点)建立双重聚合酶链式反应(duplex PCR,DPCR)检测副溶血性弧菌(VP)体系并评价.方法 对建立的DPCR检测体系,用单盲法评估特异性和灵敏度,用人工模拟样品、腹泻标本和水产品进行现场方法学评估.结果 该法具有高特异性(100％)和灵敏度(≥1.5 ng/μl),用所建立的方法和培养法平行检测腹泻标本、市售水产品中的VP,阳性率差异无统计学意义,对VP流行株的正确判断率为93.5％(29/31);对腹泻标本24 h内、模拟样品增菌后4～8h内检测并报告VP大流行株.结论 DPCR结合常规样品增菌能加快样品中VP的检测和报告,为及时处理疫情提供技术支持.