日本血吸虫副肌球蛋白T细胞表位的预测和鉴定

目的鉴定日本血吸虫副肌球蛋白的 T细胞表位. 方法用 SYFPEITHI软件预测日本血吸虫(中国大陆株)副肌球蛋白的 T细胞表位,候选表位分别命名为 P20、 P21、 P22、 P23、 P24.设计并合成候选表位的编码核苷酸,定向克隆入融合表达载体 pET- 32c(+ ),经酶切及测序鉴定出重组克隆. 阳性克隆经 IPTG诱导表达,表达产物以 Ni2+- NTA柱亲和层析及透析纯化.纯化后的硫氧还蛋白( Trx)融合蛋白体外刺激 C3H/HeJ及 C57BL/6小鼠腹股沟淋巴结或脾脏单个核细胞, 3H- TdR掺入法检测其增殖.结果候选表位中 P20、 P21、 P22、 P23能有效刺激 C3H鼠致敏淋巴细胞细胞增殖, P20、 P22能刺激 C57鼠致敏淋巴细胞增殖. 结论 P20和 P22可能是日本血吸虫副肌球蛋白的通用性 T细胞表位.