miR-374a-3p靶向Syk对ox-LDL诱导内皮细胞损伤及炎症反应的影响

目的 探讨miR-374a-3p对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤及炎症反应的影响及作用机制.方法 实验分为ox-LDL组、对照(Con)组、miR-NC组、miR-374a-3p组、anti-miR-NC组、anfi-miR-374a-3p组、ox-LDL+miR-NC组、ox-LDL+miR-374a-3p组、ox-LDL+si-NC组、ox-LDL+ si-Syk组、ox-LDL+ miR-374a-3p+ pcDNA3.1组、ox-LDL+miR-374a-3p+pcDNA3.1-Syk组.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-374a-3p表达水平;蛋白质印迹(WesternBlot)检测脾酪氨酸激酶(Syk)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白表达水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量水平;荧光素酶报告实验检测miR-374a-3p和Syk的靶向关系.结果 ox-LDL作用的HUVEC中miR-374a-3p低表达,Syk高表达;细胞活性显著降低,细胞凋亡率显著升高,TNF-α、IL-6含量显著升高(P＜0.05).过表达miR-374a-3p和抑制Syk表达抑制ox-LDL作用的HUVEC凋亡和炎症因子TNF-α、IL-6的释放.miR-374a-3p靶向调控Syk,过表达Syk逆转了miR-374a-3p对ox-LDL作用的HUVEC损伤及炎症因子释放的抑制作用.结论 过表达miR-374a-3p可抑制HUVEC凋亡和炎症因子的释放,保护ox-LDL引起的HUVEC损伤及炎症反应,其机制可能与Syk有关.