氧化应激损伤对内耳毛细胞内游离钙离子和钙调蛋白表达的影响

目的 通过分析氧化应激损伤的内耳毛细胞内游离Ca2+浓度和钙调蛋白(CaM)表达水平,探讨感音性耳聋的氧化应激损伤机制.方法 采用不同浓度(50 μmol/L、100 μmol/L、200μmol/L)双氧水染毒培养内耳毛细胞,24 h后检测细胞过氧化氢酶(CAT)活性,Fluo-3 AM荧光探针定量检测细胞内Ca2+浓度,免疫荧光法分析CaM表达水平.结果 氧化损伤的毛细胞CAT活性明显下降,随着染毒浓度的增加下降更明显(F=689.9,P＜0.01);氧化损伤毛细胞游离Ca2+浓度随着染毒浓度的增加而增加(F=716.107,P＜0.01);氧化损伤的毛细胞CaM表达水平明显增加,50 μmol/L和100 μmol/L H2O2染毒组随浓度增加表达增强,但200μmol/L H2O2染毒组表达水平有所回落(F=732.727,P＜0.01).结论 氧化应激损伤导致毛细胞内游离Ca2+浓度和CaM表达增加诱发细胞凋亡是多类型感音性耳聋的重要发病机制,严重的氧化应激损伤可抑制细胞CaM表达.