单壁碳纳米管对人肝细胞HepG2的毒性和肝代谢酶影响的研究

目的 探究单壁碳纳米管(single-walled carbon nanotube,SWCNT)对人肝癌细胞HepG2的毒性及对肝代谢酶的影响.方法 0.25、0.5和1 mg/ml SWCNT处理HepG2细胞24、48和72 h,采用噻唑蓝比色法[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]测定SWCNT对肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用.蛋白印迹法(Western blot)检测肝代谢酶儿茶酚-O-甲基转移酶(Catechol-O-methyltransferase,COMT)、谷胱甘肽S转移酶P1(Glutathione S-transferase pi gene,GSTP1)和细胞色素P450亚酶(Cytochrome P450,family 1,subfamily A,CYP1A1)蛋白表达量的变化.酶联免疫吸附(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)法检测细胞上清中相关代谢酶的浓度.结果 与对照组相比,0.25、0.5和1 mg/ml的SWCNT对HepG2细胞的增殖具有明显抑制作用,差异均具有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).Western blot结果显示,随着药物浓度的增加,COMT、GSTP1和CYP1A1的蛋白水平均明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).ELISA实验结果显示,0.5和1 mg/ml的SWCNT处理细胞后,GSTP1和CYP1A1的浓度明显降低,且差异有统计学意义(P＜0.05),而COMT浓度降低,但差异并无统计学意义(P＞0.05).结论 与对照组相比,0.25～1 mg/ml的SWCNT可以抑制HepG2细胞的增殖,且呈一定的剂量和时间依赖性.SWCNT可以一定程度地抑制肝代谢酶COMT、GSTP1和CYP1A1的表达,可能与其导致细胞毒性相关.