基于NOS信号的艳山姜挥发油对ox-LDL诱导HAECs损伤的保护作用

目的:研究艳山姜挥发油(EOFAZ)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的入主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的保护作用.方法:体外传代培养HAECs,EOFAZ保护作用研究分为7组,分别为空白组(无血清ECM),模型组(200 mg·L-ox-LDL),EOFAZ高质量浓度组(200 mg·L-1ox-LDL+ 100 μg·L-EOFAZ),EOFAZ低质量浓度组(200 mg·L-1ox-LDL+ 10 μg·L-1EOFAZ),阿司匹林组(Asp,200 mg·L-1ox-LDL +2.5×10-4 mol·L-1Asp),卡维地洛组(Car,200 mg·L-1 ox-LDL+1×10-6 mol·L-1 Car),阿托伐他汀钙组(Atorv,200 mg·L-1ox-LDL+1×10-6 mol·L-1Atorv);一氧化氮合酶(NOS)信号研究分为5组,分别为空白组(无血清ECM),模型组(200 mg·L-1 ox-LDL),EOFAZ组(200 mg·L-1 ox-LDL+ 100 μg·L-1EOFAZ),NOS抑制剂组(200 mg·L-1 ox-LDL+ 100 μmol·L-1 L-NAME或300 μmol ·L-1 L-NMMA),EOFAZ加NOS抑制剂组(200 mg·L-1 ox-LDL+100 μg·L-1EOFAZ+ 100 μmol·L-1L-NAME或300 μmol·L-L-NMMA).噻唑蓝(MTT)法分析细胞存活率,酶标仪法及Griess 试剂法分别检测培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性和一氧化氮(N0)含量.化学法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱 导型一氧化氮合酶(iNOS)活性.实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测iNOS及eNOS mRNA表达水平.结果:与模型组比较,EOFAZ明显提高ox-LDL诱导损伤的HAECs的细胞存活率,抑制LDH外漏及iNOS活力(P ＜0.05,P＜0.01),促进NO及eNOS的产生(P＜0.05,P＜0.01).Real-time PCR分析表明,EOFAZ以及相关抑制剂显著下调iNOS mRNA表达水平(P ＜0.05,P＜0.o1),上调eNOS mRNA表达水平(P＜0.05).结论:EOFAZ对ox-LDL诱导损伤的HAECs具有保护作用,其作用机制与调控eNOS和iNOS的表达水平有关.