益气化痰散瘀方含药血清对低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的影响

目的 观察益气化痰散瘀方含药血清对低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)凋亡的影响,并探讨其机制是否通过线粒体途径.方法 制备益气化痰散瘀方含药血清和空白血清.组织贴块法培养大鼠PASMCs并进行a-SMA 细胞免疫荧光鉴定.MTT法筛选最佳含药血清及最佳低氧时间:常氧对照组,低氧模型组,5%含药血清、10%含药血清、20%含药血清组(含药血清用空白血清稀释),分别作用12、24、48 h.正式实验根据MTT结果分为常氧对照组、低氧模型组、最佳含药血清组,含药血清作用最佳低氧时间后,TUNEL-FITC/DAPI法检测各组PASMCs凋亡情况,Western Blot法检测各组casepase-9、casepase-3、Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 MTT结果显示益气化痰散瘀方含药血清浓度为20%、低氧作用24 h时抑制作用最强,效果最佳.TUNEL-FITC/DAPI法显示与低氧模型组比较,益气化痰散瘀方含药血清可明显促进低氧条件下大鼠PASMCs的凋亡(P<0.01);Western Blot法显示益气化痰散瘀方含药血清可升高低氧大鼠PASMCs的casepase-9、casepase-3和 Bax蛋白表达(P<0.05,P<0.01),降低Bcl-2蛋白表达(P<0.01).结论 益气化痰散瘀方含药血清可能通过线粒体途径诱导低氧大鼠PASMCs凋亡.