雄性土鳖虫中不同分子量多肽活性研究

目的:对雄性土鳖虫不同分子量物质进行活性测定,得到最强活性片段.方法:采用不同截留孔径的超滤、纳滤;DA201-c树脂、葡聚糖G25对样品进行分子量分离,得到不同分子量组分,并采用体外抗凝实验、溶栓实验、平板实验等测定其活性.结果:采用超滤、纳滤得到小于1000 Da、1000～3000 Da、大于3000 Da组分,并通过实验测定得到1000～3000 Da的物质活性最强,再通过DA201-C树脂对活性组分进行极性分离,得到三个洗脱组分:25％乙醇洗脱组分、50％乙醇洗脱组分、75％乙醇洗脱组分.并通过抗凝、溶栓试验得到50％乙醇洗脱组分活性最强.再将50％乙醇洗脱组分经过G25进行分离,得到三个峰位,分别记为FIV1、FIV2、FIV3.经抗凝、溶栓实验测得FIV2活性强.在经过高效液相得出FIV2组分的分子量集中于1000～ 1500 Da.结论:通过超滤、树脂、尺寸排阻色谱分离得到的活性组分,可以进一步进行分离,为以后的肽段测序奠定基础.