miR-1靶向调控VEGFA肺癌干细胞侵袭和转移的影响

目的:研究miR-1在肺癌干细胞(CSCs)中的表达水平,并探讨miR-1靶向调控VEGFA对肺癌CSCs侵袭和转移的影响.方法:收集肺癌患者新鲜肿瘤组织,分离培养原代肺癌细胞,经无血清悬浮培养形成肿瘤细胞球,磁珠分选肿瘤细胞球中CD133阳性的细胞.Western blot检测CD133阳性细胞中Nanog、SOX2、OCT4干性标志蛋白及miR-1在CSCs中的表达水平;经脂质体分别转染miR-1 mimic和对照48 h后,Boyden实验检测各组CSCs侵袭能力,Transwell实验检测各组CSCs转移能力.TranScan7.1预测软件及双荧光素酶报道基因试验检测miR-1对VEGFA基因的靶向作用,qRT-PCR检测miR-1 mimic对CSCs中VEGFA mRNA表达的影响.在转染miR-1 mimic的CSCs中转染vector和过表达VEGFA(oe-VEGFA)质粒,Boyden实验检测各组CSCs侵袭能力,Transwell实验检测各组CSCs转移能力.结果:Nanog、SOX2、OCT4干细胞标志蛋白在CSCs中表达增加;miR-1在CSCs中表达显著下降;转染miR-1 mimic后,CSCs侵袭和转移能力均下降(P<0.05).TargetScan7.1预测软件和双荧光素酶报道基因试验证实VEGFA为miR-1的靶基因,miR-1 mimic组VEGFA mRNA的表达减少(P<0.05).与转染miR-1 mimic和vector组相比,转染miR-1 mimic和oe-VEGFA组的CSCs侵袭和转移均增加(P<0.05).结论:miR-1在肺癌CSCs中低表达,通过负调控VEGFA抑制CSCs侵袭和转移.