中草药水提液抗肠道病毒71型的活性评估

目的:探讨中草药针对肠道病毒71型(EV71)的抗病毒作用,从而寻找抗EV71感染的有效药物.方法:应用Realtime PCR的方法检测病毒蛋白VP1的复制.采用EV71感染非洲绿猴肾上皮(Vero细胞)模型,以鱼腥草、薄荷、甘草、栀子、知母、牛蒡、黄芩、连翘、防风、柴胡、川贝母以及海金沙12种中草药的水提液预处理细胞,结合MTT方法检测细胞活力,TCID50的方法检测子代病毒的释放,应用Realtime PCR的方法检测病毒蛋白VP1的复制,评价这12种水提物抗EV71病毒能力.应用MTT和TCID50的方法检测鱼腥草是否能够直接灭活EV71病毒颗粒.利巴韦林为阳性对照.结果:在12种中草药中,只有鱼腥草水提物在0.1 mg/ml的浓度下能够显著抑制EV71感染诱导的细胞死亡.与病毒组相比,鱼腥草水提液将病毒滴度降低了4.15 logs.利巴韦林将病毒滴度降低了3.3 logs.薄荷水提物在0.1 mg/ml的浓度下对细胞有轻微的保护作用,将病毒滴度降低了0.9 logs.Realtime PCR的结果显示,鱼腥草水提液和利巴韦林均能够明显降低EV71病毒蛋白VP1的表达,鱼腥草对VP1表达的抑制作用比利巴韦林更加明显,并且鱼腥草水提液预先与病毒共同孵育能抑制病毒感染达5个log以上.结论:鱼腥草水提液在体外具有与利巴韦林相当的抗EV71病毒复制的活性,并且鱼腥草水提液能直接灭活EV71病毒,本研究证实了鱼腥草用于临床治疗手足口病的有效性.