NOX2在黄连素减轻Aβ所致神经元氧化应激损伤中的作用

目的:探讨还原型辅酶氧化酶Ⅱ (NADPH oxidaseⅡ,NOX2)是否参与了黄连素(Berberine,BBR)对β淀粉样蛋白(β Amyloid,Aβ)诱导的神经元损伤的保护作用.方法:将HT22神经元细胞分为5组,分别为正常培养的Control组、10 μM的Aβ损伤组(Aβ)、1μM的BBR保护组(BBR+Aβ)、NOX2-siRNA干扰组(NOX2-siRNA+BBR+Aβ)和乱序siRNA处理组(SC-siR-NA+BBR+Aβ),孵育24h后,采用噻唑蓝法(Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium, MTT)检测细胞活力,试剂盒检测培养基内乳酸脱氢酶(Lactic Dehydogenase,LDH)水平,Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Cleaved caspase-3和NOX2蛋白表达、试剂盒检测细胞内活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)和戊二醛(Malondialdehyde,MDA)水平.结果:与Control组相比,10 μM的Aβ可显著下调HT22细胞活力,增加LDH释放和细胞内ROS及MDA水平,上调Cleaved caspase-3和NOX2蛋白表达(P＜0.05);1μM的BBR可显著抑制Aβ对神经元细胞产生的上述氧化损伤作用(P＜0.05),而NOX2-siRNA显著逆转了BBR对Aβ诱导的HT22神经元细胞的保护作用(P＜0.05),而SC-siRNA未对BBR的上述细胞保护作用产生显著影响(P＞0.05).结论:NOX2蛋白介导了BBR对暴露于Aβ中的神经元细胞的保护作用.