AFAP1在博来霉素诱导的A549细胞衰老中的作用机制研究

目的:研究AFAP1在博来霉素诱导的A549细胞衰老模型中的作用及分子机制.方法:用50 μg/mL的博来霉素处理A549细胞5天建立细胞衰老模型.用相同浓度的博来霉素处理细胞1-5天观察细胞从周期阻滞到衰老的过程,SA-β-Gal染色检测衰老细胞数目,用Western blot方法检测AFAP1、p21、c-Src等蛋白表达.过表达AFAP1后,观察细胞衰老状态及各蛋白表达水平变化.结果:50 μg/mL的博来霉素处理A549细胞5天后可以建立细胞衰老模型,表现为BLM组SA-β-Gal阳性细胞数升高(P＜0.01)且细胞体积显著增大(P＜0.01),p21表达水平升高.在衰老的A549细胞中,AFAP1和激活型(Src pY416)表达水平变化一致,从BLM处理后出现升高第4天开始明显下降在第5天最低,c-Src和Src pY527表达水平不变.过表达AFAP1后再用博来霉素诱导,SA-β-Gal阳性细胞数及细胞体积、Src pY416和p21表达与空载对照比较未发现有明显差异(P＞0.05).结论:衰老的A549细胞中AFAP1表达下调,c-Src活性降低;过表达AFAP1不能减轻博来霉素诱导的A549细胞衰老,也不能抑制衰老细胞中的c-Src的活性下降.