FBW7泛素化修饰Snail促进上皮间质转化的实验研究

目的:探讨FBW7(F-box/WD repeat-containing protein 7)是否参与转录抑制因子Snail的泛素化修饰,通过调节上皮间质转化(EMT)进而导致非小细胞肺癌的侵袭和转移,为治疗非小细胞肺癌(NSCLC)患者晚期转移提供新的思路.方法:首先,通过Western Blot方法检测多种人肺细胞系中Snail的表达水平.上调(药物处理)及下调(设计并合成特异性shRNA转染)H460细胞中FBW7的表达后,检测Snail的表达水平.采用平板克隆及Transwell方法检测下调FBW7的H460细胞形态改变和侵袭转移能力变化.结果:人非小细胞肺癌H460细胞中Snail表达水平较高.上调FBW7表达可使Snail表达下降,经蛋白酶抑制剂MG132处理后Snail表达升高;而下调FBW7表达后Snail表达增加.下调FBW7表达细胞后,细胞形态改变,侵袭转移能力增强.结论:FBW7参与了Snail泛素化修饰,进而经蛋白酶体途径将其降解引起EMT,导致肿瘤转移和进展的发生.