体外研究UGT2B7基因SNP rs28365062对霉酚酸酯代谢的影响

目的:体外研究尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT2B7)基因SNPrs28365062对霉酚酸酯(MMF)代谢的影响,明确该位点变异是否与MMF副作用具有潜在关系.方法:采用基因重组、定点突变技术构建UGT2B7基因SNP rs28365062不同等位基因过表达载体,POLO3000转染法将重组过表达载体转染HEK293细胞,采用液相色谱-质谱联用仪(LC/MS/MS)系统检测霉酚酸(MPA)代谢产物--酰基化葡萄糖醛酸化物(AcMPAG)24小时的生成量来评估转染不同等位基因细胞的酶活性.结果:成功构建过表达载体pIRES2-EGFP-prom(A)和pIRES2-EGFP-prom(G)并转染至HEK293细胞.LC/MS/MS系统检测结果显示携带G等位基因的突变型UGT2B7代谢MMF产生AcMPAG的能力降低,产物AcMPAG 24小时的生成量仅为野生型的18.60％(P＜0.001).结论:UGT2B7基因SNP rs28365062可显著影响MMF代谢产物AcMPAG的生成,可能是导致病人对MMF产生不同程度副作用的因素之一.