ELIspot法观察中药红曲对强直性脊柱炎外周血单个核细胞分泌TNF-α的影响

目的 使用ELIspot法观察中药红曲对强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis)患者外周血单个核细胞分泌TNF-α的影响.方法 采集强直性脊柱炎病情活动期患者(均符合1984年美国风湿病协会关于强直性脊柱炎的诊断)的外周血,分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),制成细胞悬液,以每孔2.5 ×105个细胞种植到包被有抗肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)抗体的96孔酶联免疫(enzyme-linked immunospot,ELIspot)板上.分为正常对照组、阴性对照组(TNF-α抑制剂组)、阳性对照组[脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激]、红曲高浓度组(0.5mg/mL)、红曲中浓度组(0.25mg/mL、红曲低浓度组(0.125 mg/mL),细胞种植的同时给予阴性药物、阳性药物和红曲高中低三种浓度药物刺激,24后检测TNF-α分泌情况.结果 红曲高中低浓度组的ELIspot检测,斑点计数均少于正常组,其中红曲高、中浓度组与正常对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 ELIspot检测是一种较好的用于观察药物对细胞作用效果的方法;红曲能减少强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞TNF-α的分泌.