腺苷A2a受体在博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化中的作用

目的:观察腺苷A2a受体(A2aR)在小鼠肺纤维化形成中的调控作用.方法:30只雄性SPF级野生型BALB/C小鼠和20只A2aR基因敲除BALB/C小鼠,随机分为以下5组:野生型小鼠对照组(A组)、野生型小鼠纤维化组(B组)、A2aR基因敲除小鼠对照组(C组)、A2aR基因敲除小鼠纤维化组(D组)、野生型小鼠纤维化+A2aR激动剂(CGS21680)组(E组),每组各10只.纤维化组小鼠气管内注入博莱霉素(bleomycin,BLM)溶液5μl(5 mg/kg体重),对照组在气管内注入等体积生理盐水,注射后立即将小鼠直立旋转3～5 min,使其均匀分布于两肺.A、B、C、D各组每天腹腔注射生理盐水0.5ml,E组每天腹腔注射A2aR激动剂(CGS21680)0.5 m1(0.25 mg/kg体重),连续28d.第29天取血检测血清转化生长因子β1(TGF-β1)含量;检测肺组织中羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)、TGF-β1和A2aR蛋白质含量,TGF-β1 mRNA、A2aRmRNA的表达,并观察肺组织光镜和超微结构.结果:①光镜和超微结构提示,B组肺泡壁增厚破坏,肺泡腔狭窄或部分陷闭,纤维增生,炎细胞浸润,Ⅰ型、Ⅱ型肺泡上皮细胞明显空泡化,D组较B组明显,E组表现较B组减轻.Masson染色提示B组、D组小鼠肺组织纤维增生明显,E组明显减少,提示基因缺失加重了小鼠肺纤维化的形成.②与A组比较,B组血清TGF-β1含量,肺组织Hyp含量,TGF-β1、A2aR蛋白质含量和TGF-β1 mRNA、A2aR mRNA的表达均明显增高(P＜0.01,P＜0.05).与C组比较,D组血清TGF-β1含量、肺组织Hyp、TGF-β1含量和TGF-β1 mRNA表达明显增高(P＜0.01,P＜0.05),提示肺纤维化小鼠肺组织Hyp含量增高,TGF-β1表达上调.③与B组相比,D组血清TGF-β1、肺组织Hyp、TGF-β1含量和TGF-β1 mRNA表达明显增高(P＜0.01).与B组比较,E组A2aR蛋白质含量和A2aRmRNA的表达均增高(P＜0.01),而血清TGF-β1、肺组织Hyp和TGF-β1蛋白含量及TGF-β1 mRNA表达较B组明显下降(P＜0.01,P＜0.05),提示A2aR基因敲除小鼠肺组织Hyp含量增高、TGF-β1表达上调;A2aR激动剂可使A2aR表达上调、TGF-β1表达下降.结论:A2aR基因敲除小鼠的肺纤维化明显增加.A2aR在肺纤维化形成中反应性增高,可通过降低TGF-β1的表达而抑制肺纤维化形成.