miR-202通过抑制PGC1β表达促进3T3-L1前脂肪细胞分化

目的 观察miR-202对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响及可能的机制.方法 通过慢病毒感染构建稳定表达AMO-miR-202和乱序对照miRNA细胞系,随后诱导分化.至分化的第9天,油红O染色观察细胞内脂滴的情况;RT-PCR检测过氧化物酶体激活增殖受体γ2(PPARγ2)和aP2的基因表达;Western blot检测PPARγ2、aP2和miR-202靶基因PPARγ辅助活化因子1β(PGC1β)蛋白表达.结果 经293T细胞慢病毒包装AMO-miR-202、乱序对照miRNA,荧光显微镜下可见约80%~90%荧光细胞;将上述2组病毒液分别感染3T3-L1前脂肪细胞后,可见约70%~80%荧光细胞.AMO-miR-202组细胞内脂滴及PPARγ2和aP2的mRNA表达显著低于乱序对照组和对照组(P<0.05).与乱序对照组和对照组相比,AMO-miR-202组PGC1β蛋白表达显著增加(P<0.05),PPARγ2和aP2蛋白表达显著降低(P<0.01),而乱序对照组和脂肪细胞组上述指标无明显差异.结论 miR-202可能通过抑制PGC1β、提高PPARγ2和aP2的表达促进3T3-L1前脂肪细胞分化.