核糖体蛋白L12-L10相互作用抑制剂的筛选及其抗结核活性的研究

目的以 L12-L10相互作用为靶点筛选具有抗结核活性的先导化合物。
　　方法应用酵母双杂交模型 AH109（pAD-L12+pBD-L10）通过生长抑制方法筛选阳性化合物，以 AH109（pAD-T +pBD-53）作为对照；通过96孔板法检测阳性化合物对耻垢分枝杆菌的抑制活性；应用定量微孔板快速显色法（MABA）检测抗结核杆菌活性；通过β-半乳糖苷酶活性定量检测判断阳性化合物在模型上对 L12-L10相互作用的阻断活性；应用体外蛋白表达系统检测阳性化合物对蛋白表达的抑制作用；应用平皿二倍稀释法检测阳性化合物的药敏作用。
　　结果筛选到4个在模型上具有活性的阳性化合物，其对耻垢分枝杆菌具有比较好的抑制活性，其最小抑制浓度（MIC）在3.125~12.5μg/ml 之间；其中 IBM-T275对结核分枝杆菌标准株和临床分离株均具有比较好的抑制活性， MIC 在5~10μg/ml 之间，而对细菌抑制活性较低，其MIC 均在64μg/ml 以上；IBM-T275能够抑制酵母模型内β-半乳糖苷酶的表达，并且能够体外抑制蛋白表达，其 IC50为12.57μg/ml。
　　结论筛选到1个具有抗结核杆菌活性的阳性化合物，其抗结核活性可能与阻断 L12-L10蛋白相互作用相关。