基于CRISPR/Cas9的雄激素受体基因敲除的实验研究

目的探讨细胞水平的雄激素受体（AR）基因敲除方法，为前列腺疾病AR通路的功能研究提供细胞株材料。方法通过在线软件设计针对AR的sgRNA靶向序列，将设计好的sgRNA靶序列克隆到PX330载体中并测序验证。将克隆好的CRISPR?AR载体转染T293细胞，提取DNA，PCR产物酶切和测序鉴定基因敲除效率。结果 CRISPR?AR载体测序证明质粒载体构建成功，293T细胞转染和酶切鉴定实验证明CRISPR?AR载体具有95.3%的敲除效率。结论基于CRISPR/Cas9技术构建的CRISPR?AR载体可用于细胞的AR基因敲除，可进一步构建AR基因敲除的细胞株。