人肺鳞癌干细胞的体外分离培养和鉴定

背景：研究显示可从肺癌细胞系中分离出肺癌干细胞，但对于从新鲜肺鳞癌标本中原代培养肺癌干细胞的报道较少。
　　目的：探索从新鲜肺鳞癌组织标本中分离肺鳞癌干细胞的可行方法。
　　方法：借助胶原酶消化法、密度梯度离心法和Hoechst33342染料外排法初筛SP细胞，将初筛细胞置于条件培养基分离培养，后续应用流式细胞分析及分选技术，进一步分离纯化肺鳞癌干细胞。实验结合CD133和CD44鉴定目标细胞，并计数第4代细胞CD133+、CD44+及CD133/CD44双阳性细胞的阳性率。
　　结果与结论：接种后0.5 h细胞贴壁生长，培养第4天形成典型的细胞集落，第7天呈铺路石样外观，细胞数量级可达108。传代培养第4代肺癌干细胞的CD133+、CD44+和CD133/CD44双阳性细胞数明显增多。说明
　　实验初步从肺鳞癌患者新鲜肺组织标本中分离培养并快速扩增SP细胞，并从中获取更多更纯的干细胞样肺鳞癌细胞，为进一步研究肺鳞癌干细胞的异质性和耐药性奠定基础。