大鼠小梁细胞的体外培养及弹性模量的测量

目的 小梁网是由小梁薄片和其上的小梁细胞构成的网状结构,它对眼压和房水流出具有重要的调节作用,同时小梁细胞的力学特性和生物学特性与房水流出阻力密切相关.因此本研究主要探讨体外培养的大鼠小梁细胞的生物学特性并应用原子力显微镜测量其弹性模量,为今后建立高眼压动物模型并探究原发性开角型青光眼的发病机制提供理论依据.方法 取3只SD大鼠双眼小梁网组织,应用消化法对小梁细胞进行体外混合培养.倒置相差显微镜和免疫组化SABC染色的方法确定小梁细胞并观察其生物学特性.应用原子力显微镜压痕方法测量细胞的弹性模量.结果 大鼠小梁细胞10 d左右达到融合,细胞形态多样,免疫组化检测结果显示层粘连蛋白、纤维连接蛋白和神经元特异性烯醇化酶染色阳性.小梁细胞弹性模量为1.02 kPa±0.66 kPa.结论消化法成功培养出大鼠小梁细胞,并利用原子力显微镜测得小梁细胞的弹性模量,为之后研究青光眼小梁细胞的特性奠定基础.